Técnicas e Práticas - Diafanização

A diafanização ou clarificação é um processo químico frequentemente utilizado para órgãos laminares como folhas inteiras ou suas partes, com o objetivo principal de estudar o padrã de nervação, a epiderme e as diferenciações das folhas(1).

Para a diafanização foi preparada uma solução de 1:1 de peróxido de hidrogênio e ácido acético. Esta solução, juntamente com as folhas foram para a estufa a 60ºC. Para a dissociação da epiderme foliar utilizou-se a mesma solução. O resultado segue na imagem abaixo.

Fig. 1 - Resultado da diafanização
Fonte: Arquivo pessoal

Após a diafanização, foi feita a coloração do material com safranina e feita a montagem das lâminas. O resultado pode ser visto nas imagens abaixo.

Fig. 3 - Material corado com safranina.
Fonte: Arquivo pessoal

Fig. 4 - Material corado com safranina.
Fonte: Arquivo pessoal

Finalizado esse processo, foi feito o corte dos blocos preparados na aula anterior, da folha brinco de princesa. Os cortes foram feitos no micrótomo, corados com azul de toluidina e foram montadas lâminas permanentes com entellan. Essas lâminas fazem parte do laminário da Histologia Vegetal do curso de Biotecnologia. Os resultados, visto a microscopia óptica, podem ser vistos nas imagens a baixo.

Fig. 5 - Brinco de Princesa corada com azul de toluidina.
Fonte: Arquivo pessoal

Fig. 6 - Gramínea corada com azul de toluidina.
Fonte: Arquivo pessoal

Referências:

1. SOUZA, Luiz Antonio de et al. Morfologia & Anatomia Vegetal - Técnicas e Práticas; Parte I, pág 48; 2005.