Técnicas e Práticas - Preparo e Montagem de Lâminas

4. Preparação de Lâminas

A preparação de lâminas histológicas é uma etapa importante para que se tenha um resultado final  de fácil observação ao microscópio óptico.

As lâminas de células, tecidos ou órgãos para estudo ao microscópio óptico podem ser de três tipos(1):

•  Lâmina Temporária

Serve para observações rápidas e para testes histoquímicos. Para a preparação:

> uma lâmina limpa;

> colocar sobre ela uma gota de água ou glicerina 33%;

> obter o corte do material;

> fazer a clarificação do corte em hipoclorito de sódio;

> corar a secção com o corante adequado;

> depositar o corte cuidadosamente em água ou glicerina;

> cobrir cuidadosamente a preparação com uma lamínula

• Lâmina Semipermante

É mais duradoura que a temporária, durando em média 6 meses. Para a preparação:

> fazer o corte à mão livre ou em micrótomo, fazer a clarificação em hipoclorito de sódio 33%, lavá-la em água destilada e corá-la com o corante adequado;

> montar o corte com uma gota de glicerina 33% entre lâmina e lamínula;

>após a montagem, vedar a lâmina com esmalte incolor;

>etiquetar a lâmina com informações como: nome da espécie, órgão ou a estrutura; tipo de corte; corante usado; fixador e data(1).

Fig. 1 - Lâmina finalizada
Fonte: Arquivo pessoal

• Lâmina Permanente

As lâminas permanentes podem ser emblocadas em parafina(2), polietilenoglicol(3), goma glicerinada(4) ou historresina. Na historresina envolve as etapas de fixação, desidratação, parainfiltração, inflitração, polimerização, retirada dos blocos do moldes, montagem dos blocos e corte do material em micrótomo de rotação(1).

Fig.3 - Bloco de historresina
Fonte: Arquivo pessoal

Fig.2 - Bloco de historresina
Fonte: Arquivo pessoal

Finalizando o processo de preparo e montagem das lâminas, com o resultado final será possível a visualização da amostra ao microscópio óptico, como nas figuras abaixo:

Fig. 5 - Amostra finalizada
Fonte: Arquivo pessoal

Fig. 4 - Amostra finalizada
Fonte: Arquivo pessoal

Referências:

1. SOUZA, Luiz Antonio de et al. Morfologia & Anatomia Vegetal - Técnicas e Práticas; Parte I, pág 21 a 27; 2005.

2. JOHANSEN, D. A. Plant Microtechnique. New York: McGraw- Hill. 1940.

3.KRAUS & ARDUIN, 1997

4. COE & MARTIN, 1920

5. CARMELLO-GUERREIRO, S. M. Técnica de inclusão de material vegetal em historresina. Botucatu: Departamento de Botânica da UNESP, 1995.